การวินิจฉัยระดับโมเลกุลสอดคล้องกับชุดของเทคนิคระดับโมเลกุลที่มีจุดมุ่งหมายเพื่อระบุการเปลี่ยนแปลงใน DNA ที่อาจบ่งบอกถึงโรคทางพันธุกรรมหรือมะเร็งเช่น นอกจากนี้ยังมีการใช้เทคนิคระดับโมเลกุลเพื่อระบุและยืนยันโรคติดเชื้อเนื่องจากเป็นวิธีการวินิจฉัยที่รวดเร็วและแม่นยำยิ่งขึ้น
การวินิจฉัยระดับโมเลกุลมีราคาแพงและดังนั้นจึงไม่ได้รับการร้องขอจากแพทย์บ่อยนักอย่างไรก็ตามมันให้ผลลัพธ์ที่ถูกต้องเกี่ยวกับการปรากฏตัวของการเปลี่ยนแปลงวิธีที่มันสามารถแทรกแซงการทำงานของสิ่งมีชีวิตและการตอบสนองของผู้ป่วยต่อ การรักษา
มีไว้เพื่ออะไร
การวินิจฉัยระดับโมเลกุลสามารถทำได้หลายวัตถุประสงค์โดยมีวัตถุประสงค์หลักคือ:
- บัตรประจำตัวของการกลายพันธุ์ที่เกี่ยวข้องกับ โรคมะเร็งเม็ดเลือดขาว เช่นบัตรประจำตัวของการโยกย้าย BCR-ABL ซึ่งเป็นลักษณะของมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเรื้อรัง Myeloid (CML); การกลายพันธุ์ของ โรคทางโลหิตวิทยา เช่น hemochromatosis ทางพันธุกรรม, thrombocythemia สำคัญและ thrombophilia การเปลี่ยนแปลงระดับโมเลกุลที่บ่งบอกถึงการเกิด มะเร็ง เช่นลำไส้ใหญ่ปอดมะเร็งเต้านมและสมองเป็นต้นการวินิจฉัยโรค ติดเชื้อ เช่นไวรัสตับอักเสบท่อปัสสาวะอักเสบ toxoplasmosis leishmaniasis เป็นต้นนอกจากการระบุ เชื้อไวรัส HPV
การวินิจฉัยระดับโมเลกุลแม้จะถือว่ามีราคาแพงเมื่อเทียบกับเทคนิคการวินิจฉัยอื่น ๆ มีความแม่นยำมากขึ้นเนื่องจากสามารถแจ้งการเปลี่ยนแปลงที่เกี่ยวข้องกับโรคบางอย่างและระดับของอิทธิพลของการเปลี่ยนแปลงนี้ในร่างกายจึงช่วยให้การรักษาของบุคคล
นอกจากจะใช้สำหรับการวินิจฉัยโรคต่าง ๆ แล้วยังใช้เทคนิคระดับโมเลกุลเพื่อประเมินการตอบสนองต่อการรักษาโดยเฉพาะอย่างยิ่งในผู้ที่เป็นโรคมะเร็งซึ่งเป็นหนึ่งในวิธีที่มีประสิทธิภาพที่สุดในการบ่งชี้ความก้าวหน้าของโรคและการกำเริบของโรค
เป็นอย่างไรกันบ้าง
การวินิจฉัยระดับโมเลกุลสามารถดำเนินการกับตัวอย่างใด ๆ ได้รับการร้องขอจากแพทย์ที่สามารถให้ข้อมูลที่ดีที่สุดเกี่ยวกับสภาพของผู้ป่วยซึ่งอาจเป็นปัสสาวะน้ำลายหรือในกรณีส่วนใหญ่เลือด ไม่จำเป็นต้องอดอาหารหรือเตรียมการใด ๆ สำหรับการสอบ
ตัวอย่างจะถูกรวบรวมและส่งไปยังห้องปฏิบัติการพร้อมกับคำแนะนำของแพทย์เพื่อแจ้งการสอบหรือประเภทของการวิจัยที่ควรทำ เทคนิคระดับโมเลกุลที่ทำขึ้นอยู่กับการสอบที่ร้องขอและเกี่ยวข้องกับขั้นตอนที่แม่นยำซึ่งมีจุดมุ่งหมายเพื่อระบุว่ามีหรือไม่มีการเปลี่ยนแปลงที่แพทย์ร้องขอ
โดยปกติจะใช้ตัวอย่างเพียงเล็กน้อยเท่านั้นส่วนที่เหลือจะถูกเก็บไว้เพื่อให้การสอบซ้ำถ้าจำเป็น
PCR
PCR ย่อมาจากปฏิกิริยาลูกโซ่ โพลีเมอเรส หรือปฏิกิริยาลูกโซ่ โพลีเมอเรส เป็นเทคนิคระดับโมเลกุลที่ประกอบด้วยการขยายส่วนของวัสดุทางพันธุกรรมทั้ง DNA หรือ RNA โดยมีวัตถุประสงค์ในการระบุการกลายพันธุ์และช่วยในการวินิจฉัยโรค.
เทคนิคนี้ทำจากการสกัดและการทำให้บริสุทธิ์ของสารพันธุกรรมซึ่งจะถูกวางในส่วนผสมที่หนึ่งในองค์ประกอบเป็นเอนไซม์ จำกัด ที่แตกต่างกันไปตามการตรวจสอบที่ร้องขอและมีฟังก์ชั่นที่จะตัดวัสดุเป็นชิ้นส่วน เพื่อให้สามารถระบุการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมที่เป็นไปได้ การผสมถูกวางใน thermocycler ซึ่งเป็นอุปกรณ์ที่ทำหน้าที่ผ่านการเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิที่ระบุโดยมืออาชีพตามการสอบและดังนั้นจึงช่วยให้การขยายของชิ้นส่วนทางพันธุกรรม ในกรณีของ PCR ทั่วไปหลังจากที่ขยายผลิตภัณฑ์ PCR จะถูก electrophoresis ซึ่งเป็นเทคนิคโมเลกุลขึ้นอยู่กับน้ำหนักและขนาดของชิ้นส่วนนั่นคือตามลักษณะเหล่านี้รูปแบบวงถูกสร้างขึ้นซึ่งมีการวิเคราะห์ทำ ขึ้นอยู่กับวงควบคุมที่เป็นบวกนั่นคือวงดนตรีที่รู้จักกันเพื่อให้สอดคล้องกับการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรม
PCR แบบเรียลไทม์ หรือที่เรียกว่า qPCR เป็นชนิดของ PCR เชิงปริมาณซึ่งนอกเหนือจากการระบุการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมแล้วมันยังสามารถให้ข้อมูลเกี่ยวกับการแสดงออกของยีนนั่นคือยีนที่ถูกเปลี่ยนแปลงนั้นแสดงออกในสิ่งมีชีวิตมากแค่ไหน ดังนั้นจึงสามารถใช้เพื่อช่วยวินิจฉัยและติดตามการรักษา PCR แบบเรียลไทม์ไม่จำเป็นต้องมีอิเล็กโตรโฟรีซิสกระบวนการทั้งหมดในการขยายและวิเคราะห์สารพันธุกรรมทำโดยอุปกรณ์และผลลัพธ์จะถูกตีความโดยผู้เชี่ยวชาญด้านสุขภาพที่ได้รับการฝึกฝนมา
ลำดับ
Sequencing เป็นเทคนิคเกี่ยวกับโมเลกุลที่ประกอบไปด้วยลำดับของ DNA nucleotides ซึ่งเป็นหน่วยขึ้นรูปของวัสดุทางพันธุกรรม การเรียงลำดับเกิดขึ้นจากปฏิกิริยาที่คล้ายกับ PCR อย่างไรก็ตามในการผสมการขยายนิวคลีโอไทด์ที่ถูกดัดแปลงจะถูกเพิ่มโดยการเพิ่มฟลูออโรโครเมสซึ่งเมื่อวัสดุถูกขยายนิวคลีโอไทด์ที่ถูกดัดแปลงจะถูกรวมเข้าไปใน DNA และสร้างชิ้นส่วนต่างๆ สอดคล้องกับผลิตภัณฑ์ลำดับ
ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาถูกวางไว้ในอุปกรณ์ที่เรียกว่าซีเควนเซอร์ของ DNA ซึ่งเมื่อชิ้นส่วนถูกเข้าถึงโดยเลเซอร์ของอุปกรณ์ฟลูออโรโครเมสก็ตื่นเต้นตื่นเต้นเปล่งฟลูออเรสเซนซึ่งระบุโดยอุปกรณ์ด้วยยอดเขา เพื่อนิวคลีโอไทด์ ในตอนท้ายของการเกิดปฏิกิริยาอุปกรณ์จะแจ้งลำดับดีเอ็นเอเพื่อให้สามารถช่วยแพทย์ในการวินิจฉัยโรคทางพันธุกรรม
